La confirmation de symptômes évoquant une maladie rhumatismale est principalement réalisée par l’évaluation/la détection sérologique d’auto-anticorps spécifique de la maladie (par ex. la recherche d’anticorps anti-nucléaires, ANA).

Malgré l’essor de techniques immuno-enzymatiques comme l’ELISA et d’autres méthodes, le dépistage des ANA par IFI demeure actuellement la technique de référence pour le diagnostic des maladies rhumatismales systémiques comme : le lupus érythémateux (LES), le syndrome de Sjögren (SS), la sclérose systémique progressive (SSP), la dermatomyosite-polymyosite (DM/PM) ou la connectivite mixte (MTCM).

Les directives internationales recommandent de réaliser le dépistage des ANA sur la lignée cellulaire épithéliale humaine HEp-2. D’autres substrats cellulaires comme le protozoaire Crithidia luciliae (pour la détection des auto-anticorps anti-ADNdb) et les granulocytes humains (pour la détection des auto-anticorps anti-cytoplasme des polynucléaires neutrophiles, ANCA) sont régulièrement employés dans les procédures d’IFI sur cellules.

Les auto-anticorps produisent des aspects de fluorescence caractéristiques dont l’analyse dépend de la connaissance et de l’interprétation subjective des experts de laboratoire, et la grande variabilité intra- et inter-laboratoire qui en découle représente un problème majeur pour le diagnostic des maladies auto-immunes.

L’accroissement de la charge de travail et la nécessité d’une évaluation standardisée et reproductible des tests d’IFI sur substrat cellulaire ont encouragé les laboratoires d’auto-immunité à s’orienter vers l’automatisation.

Le nouveau système Zenit G Sight d’ A. Menarini Diagnostics a été spécifiquement conçu pour surmonter les problèmes spécifiques de l’IFI rendant la technique particulièrement adaptée au diagnostic sérologique automatisé des maladies auto-immunes en routine de laboratoire.

Les principales étapes de la méthode sont:

1. Dilution du sérum (par exemple 1:80) et incubation avec le substrat fixé sur les lames pendant 30 min dans une chambre humide à température ambiante.
2. Incubation avec le conjugué (anticorps de chèvre anti-Ig humaines marqué à l’ isothiocyanate de fluorescéine, FITC) à température ambiante pendant 30min
3. Evaluation: analyse visuelle ou automatisée des lames

La détection des ANA effectuée sur cellules HEp-2 génère des aspects de fluorescence spécifiques.

Les cinq aspects principaux décrits sont les suivants 

* Les aspects de fluorescence ANA sont représentés car le test ANA Hep-2 constitue le dosage le plus utilisé pour le dépistage visuel/automatique des maladies rhumatismales

L’IFI est une méthode simple, rapide et peu coûteuse pour le dépistage de routine des maladies auto-immunes ; elle présente cependant plusieurs inconvénients qui peuvent être facilement résolus grâce à l’automate Zenit G Sight.

• Analyse subjective
• Nombre limité d’échantillons
• Processus de dépistage long et laborieux
• Blanchiment du fluorochrome
• Nécessité d’aménager un espace pour les archives
• Difficulté pour échanger des résultats avec d’autres laboratoires

• Quantification objective et reconnaissance des aspects spécifiques de fluorescence
• Gestion des cadences élevées de travail
• Discrimination efficace et automatique des sérums +/-
• Données numériques
• Stockage de fichiers et consultation simple des résultats précédents
• Accès et échange de données en ligne

• Précis et utile aux cliniciens
  en fournissant un rapport quantitatif/qualitatif complet sur le statut sérologique relatif à la présence d’auto-anticorps
• Fiable
  en générant des résultats reproductibles et comparables (concordance intra- et inter-laboratoire)
• Rentable
  en allégeant la lourde charge de travail des laboratoires traitant un nombre élevé d’échantillons en maximisant l’efficacité et en optimisant les ressources humaines
• Sûr
  en sauvegardant les résultats et en améliorant la gestion des données